5．超薄切片 电镜标本制作见第七章 ，应用超薄切片机（Ultrotome）进行切片。
6．碳蜡切片 碳蜡（Carbowax），学名聚乙烯二醇（Polyethlene glycol, PEG）为水溶性蜡。根据其分子量不同，碳蜡有多种，如400、800、1000、1500、4000、6000等，用于组织包埋的有1500、4000两种，其熔点分别38℃C和52。C左右，常温下为固体石蜡状，加温熔化呈液体状。
本法的特点是组织固定水洗后，不需脱水透明可直接浸蜡包埋，且切片方法与常规石蜡切片相同。切下的组织片漂浮水面后自然展开，碳虹迅速深化，组织片即可展平，制片过程简单易行。
具体操作简述如下：组织块不宜过大，一般限定在1.5cm×1cm×0.1cm以内。①组织固定后充分水洗去除固定液，用滤纸吸干组织表面水。②将组织浸入碳蜡（1500）内，45℃30min。③再次浸入混合混合碳蜡液（1500和4000等量混合液），52℃30min。④浸入等量混合碳蜡液（或根据气温、湿度变化调整4000和5000混合比例，如气温高湿度大可以4000：1500=3：2混合，反之，则2：3混合）。⑤用等量混合碳蜡或调整混合碳蜡包埋成组织蜡块。⑥切片与石蜡切片相同。在操作过程中，碳蜡组织块应尽量避免与水或冰接触，贮存时应密封干燥冷藏。
本法优点是操作程序减少，时间缩短，组织不经有机溶剂损害、温度低、抗原性保存比石蜡切片好，组织结构清晰。缺点是夏季室温高时切片较困难，连续切片不如石蜡切片顺利；由于碳蜡有强吸湿性，不易长期保存。
7．玻片处理和涂胶 在免疫组化染色过程中由于各种原因常造成标本（细胞制片和组织切片）脱片现象，影响了工作质量和速度。一般采取两种方法即可防止脱片现象出现。
（1）载玻片和盖玻片处理：新载玻片上有油污，必须经过清洁液浸泡12～24h，流水充分漂洗后用蒸馏水清洗5遍以上，浸泡在95%酒精内2h，用绸布擦干或用红外线烤箱烤干均可，贮放于玻片盒内备用。盖玻片很薄，以上处理程序必须缩短，清洁液浸泡只需2h，流水冲洗注意勿损伤玻片等。
（2）载玻片上涂粘附剂：粘附剂种类较多，常用的有以上几种：①树脂胶（Resin glue）又称白色乳胶，为木工用，有进口，国产之分，有人认为进口白色树脂胶较稳定，我们认为国产白乳胶（聚醋酸乙烯乳液J-北京产）质量尚稳定。使用浓度为1%～2%，以蒸馏水稀释即可。②甘油明胶，混匀后涂在载玻片上，切片贴附后置有副醛的干燥器内，加热80℃1h。③甲醛明胶， 混合后即可涂片。④铬明矾明胶， 混合后即可涂片，置37℃温箱烤干。⑤多聚赖氨酸液：多聚赖氨酸0.1g，加蒸馏水10ml，混合后即可涂片。此液不宜多配制。⑥3-Amino propy Eri-ethoxy Silame（APES）。
粘附剂2～5配制法见附录一。
参考文献
1．Bullock CR, et al . Techniques in immunocytochemistry, Vol 1. London New York: Academic Press, 1982
2.Coleman DV, et al. Immunoperoxidase staining tumor marker distribution studies in cytologic specimens. Acta Cytologica, 1981:25:205～206
3.Jacobsen M, et al .The effect of fixation and trypsinization on the immunohistochemical demonstration of intracellular immunoglobulin in paraffin embedded material .Acto Path. Microbiol . Scand . ,Sect. A, 1980;88:369～376
4. Kayhko?K. Optimal fixation of the immunoperoxidase identification of human J chain from tissue sections. Histochemistry, 1980;70:23-27
5.Leathem A, et al .Fixation and immunohistochemistry of lymphoid tissue.J. Clin Path, 1980;33:1010-1012
6.Martin SE,et al Immunologic methods in cytology:definitive diagnosis of non-Hodgkin’s lymphomas using immunologic markers for T-and B-cells .Am . Clin . Path.,1984;82:666～673
7.Mason DY,et al, Technical aspects of lymphoma immunohistology.J. Histochem. Cytochem., 1980;28:731-745
8.Montero C.Immunocytochemistry. 2nd ed. New York; John Wiley and Sons, 1979
9.Walts AE, et al.SPecial tumor markers in diagnostic cytology:immunoperoxidase of carinoembryonic antigen,lysozyme and other tissue antigen in effusions, washes and aspirates. Acta Cytologica, 1983;27:408～416
10.Wordinger RJ, et al. Manual of immunoperoxidase techniques. Chicago; Americal Society of Pathologists Press, 1983
11.施达仁，等。B淋巴细胞双PAP法免疫定位方法学的探讨及其在恶性淋巴瘤诊断上的应用。肿瘤，1982；2：11-14
12．Nuovo GJ. Comparison of Bouin solution and buffered formalin fixation on the detection rate by in hybridization of human papillomavins DND in qenital tract lesions.
