五、溶液的混匀
样品与试剂的混匀是保证化学反应充分进行的一种有效措施。为使反应体系内各物质迅速地互相接触,必须借助于外加的机械作用,混匀时须防止容器内液体溅出或被污染,严禁用手指直接堵塞试管口或锥形瓶口震荡。混匀的方式大致有下面几种,可随使用的器皿和液体容量而选用。
1.旋转混匀法 用手持容器,使溶液作离心旋转。该法适用于未盛满液体试管或小口器皿,如锥形瓶,旋转试管时宜用手腕旋转。
2.指弹混匀法 用手持容器,手腕用力前后摇动使内容物混匀。还可用左手持试管上端,用右手指轻轻弹动试管下部,使管内溶液作旋涡运动;或用右手持试管上端,在左手掌上打击的方法混匀内容物。
3.颠倒混匀法 适用于有塞的容量瓶及有塞试管内容物的混匀。一般试管内容物混匀时可用聚乙烯等薄膜封口,再用手按住管口颠倒混匀。
4.吸量混匀法 用吸量管将溶液反复吸放数次,使溶液充分混匀。
5.玻棒搅动法 适用于烧杯、量筒内容物的混匀。如固体试剂的溶解和混匀。
其他尚有电磁搅拌混匀法和震荡器混匀法等。
六、台式离心机的使用
利用离心机转动的离心力,使比重较重的沉淀物沉积在管底部,上层液体为“上清液”,使用电动离心机时应严格遵守下列操作规程。
1.离心前先将盛有样品的离心管(或试管)和套管在台秤上平衡,调节双方重量相等,否则当离心机转动时容易受损。
2.双方平衡后,分别放在离心机转盘的对称两孔洞内。
3.检查电源的电压,插好插头,开动开关,然后转动速度调节器,缓慢地逐步增加转速以达到所需要的速度。在转动中,离心机机身应稳,声音均匀,如有机身不稳或声音异常,表示对称两管的重量不等,应立即停止离心。
4.离心时间到时,先逐步减慢速度,转动调节器到“停”或“0”,然后关闭开关,让它自行停止,严禁用手强制使其转动停止。(国产82-1型12管方型台式电动离心机,能自动控制工作时间。工作到预定时间并发出讯响后。离心机自动地停止运转。)
5.最后将离心管取出,离心套管倒置于固定架内。
七、分光光度法及分光光度计的使用
(一)基本原理
分光光度法是利用物质对某种波长的光具有选择性吸收的特性建立起来的鉴别物质或测定其含量的一项技术。当一束单色光通过溶液时,一部分被吸收,一部分则透过溶液。设入射光强度为I0。,透射光强度为It,,则透光度T=It/Io,吸光度(A)或光密度(O.D.)或称消光度(E)则可表示为A=-lgT。根据Lambert-Beer定律,吸光度与溶液的浓度成正比,与光束通过溶液的距离(即光程)成正比,用数学表达式表示为:
A=KLC
式中C代表该物质的浓度,L代表光程,一般以cm表示,K为摩尔消光系数,即当溶液浓度为lmol/l,光程为1cm时所测得的一定波长下的吸光度。
由于单色光透过溶液时,不仅被待测物质所吸收,而且还被比色容器与溶剂以及其它试剂吸收一部分,这部分需用空白管消除(空白液的做法即用与样本相同的一切试剂,而不含被测定的物质)
(二)波长的选择:
波长的选择一般是选择待测物质最大吸收峰的波长(λmax)。因在λmax测定吸光度,敏感度最高。(见图1-3)。在吸收峰波长处测吸光度,波长变化影响最小(如图1-3一(a、b),A带);而在其他波长处(如图1-3(a、b)B带),波长变化对吸光度影响大,甚至测得浓度一吸光度曲线不呈直线。

选择测定某一溶液所需的波长,是可以用不同的波长作该溶液的吸收光谱曲线,从曲线上选择最适当的波长来进行这一溶液的测定工作,但是,在分析工作中,尚有个别情况,不能单凭此一原则,而应根据下列三个原则,进行实际试测,然后全面考虑利弊,再行选定。
1.应使被测溶液有适当的光密度,一般而言,适当的光密度为0.1-0.7,而以0.2-0.6最理想。过低的光密度因仪器的读数误差而产生很大的相对误差,反之,过高的光密度则往往已超过直线范围而引入误差。
2.应使干扰影响降低至最低限度。在反应中,如遇不易去除的干扰色泽,应选用对此干扰色泽最不灵敏的波长。
3.应使标准曲线在尽可能大的范围内接近直线。


