高压灭菌后，可在4℃保存一年。其中，L-苏氨酸（L-Threonine）和 L-天冬氨酸（L-Aspartic acid）单独配置，过滤灭菌，其他营养成分高压灭菌后加入。
（3）CM固体培养基（含微量铁20μmol/L）
每100mL CM培养基的营养成分基础上加dd H2O至90mL，调pH＝5.8,定容至93mL，高压灭菌后冷却至55℃时，加入在烘箱中预热至55℃的5mL 40% detrose贮液，2mLFe-EDTA母液，到平板。
Fe-EDTA（1000μmol/L）母液：FeSO4.7H2O 0.0139g，EDTA-Na2 0.0186g，混合溶于50mL dd H2O中后高压灭菌。
（4）选择培养基
CM固体培养基含55μmol/L BPDS或终浓度为1mmol/L的FERROZINE
每100mL CM培养基的营养成分基础上加ddH2O至75（80）mL，调pH＝5.8，定容至79.5（84）mL，高压灭菌后冷却至55℃时，加入在烘箱中预热至55℃的5mL 40%detrose贮液，5.5mL BPDS母液（1mL FERROZINE母液），倒平板。（括号中为加入FERROZINE作为铁螯合剂的量）
BPDS母液：10mmol/L BPDS溶液，过虑灭菌。
FERROZINE母液：100mmol/L FERROZINE溶液，过虑灭菌。
3． 仪器
恒温培养箱，恒温摇床，恒温水浴锅，离心机，三角瓶，培养皿，微量取样器，1mL枪头，50mL大离心管，1.5mL小离心管，封口膜，pH试纸，牙签或接种环、小滤器、注射器、涂布器等。
五、实验程序
1． 技术路线
分别在含微量铁和BPDS/ FERROZINE（铁螯合剂）的CM固体培养基平板上划线验证功能（未转化突变体作为对照）
2． 醋酸锂转化
第一天 菌种活化
1）接种5mL液体YPAD或10mLSC,30℃下振荡培养过夜。
第二天 酵母受体细胞的摇培与转化
2）计数过夜培养物细胞密度，以最终5×106个/mL的细胞密度接种50mLYPAD培养液。
3) 置于30℃，200rpm振荡培养至2×107个细胞/mL，通常需要3-5hr，该培养物的细胞足够供10次转化用。
注意：①重要的是让细胞至少完成两次分裂；②在细胞的3-4次分裂期间，转化效率恒定。
4）用10mL无菌离心管取5mL菌液, 3000g离心5min收集细胞。
5）弃培养液，把细胞悬浮在2.5mL无菌水中，3000g离心5min离心收集细胞。
6）弃水，把细胞悬浮在0.1mL的100mmol/L（1×）醋酸锂（LiAc）/TE缓冲液中。
7）同上离心1-2min沉淀细胞（仅需将菌体离心至离心管底即可），用微量移液器小心吸出上清。
8）重复步骤6）一次，将菌悬液移至灭菌的1.5mL小离心管中。
9）将1mL单链担体DNA样品煮沸5min，快速在冰水中冷却。
注：没必要每次都煮沸担体DNA，分装成小份冻存。冻融3－4次后，需要时再煮沸，取出后应保持在冰上。
