一、目的和要求
1．掌握无菌操作技术。
2．学习微生物涂片、染色的基本技术。掌握细菌的简单染色方法。
3．巩固显微镜的使用方法。

二、原理与操作
1．无菌操作

2．细菌的简单染色
（1）观察微生物时为什么必须采用染色方法细菌、真菌、和其他微生物的细胞质是透明的，不借助染色方法很难观察到这些微生物。
（2）简单染色的生化原理
细菌细胞通常带负电荷，简单染色时采用已知的、带正电荷的碱性染料与菌体细胞黏附使菌体着色。经染色后的细菌细胞与背景形成鲜明对比。
3．操作步骤
制片——固定——吕氏碱性美蓝染液(或石碳酸复红染液)染色1-2分钟——水洗——干燥——镜检

三、器材
菌种：枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）和藤黄微球菌（Micrococcus luteus）的斜面培养物。
染液：吕氏碱性美蓝染液、齐氏石炭酸复红染液。
仪器和其他用具：显微镜、擦镜纸、 接种环、酒精灯、载玻片、镊子等。

四、实验报告
绘图示枯草芽孢杆菌和藤黄微球菌

五、预习
细菌的革兰氏染色