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植物组织石蜡切片的制作
作者:未知 来源:本站原创 时间:2005-12-6


    (五)埋蜡
    埋蜡是把材料封埋在石蜡里面,便于切片。一方面材料太小太软封在石蜡中,石蜡硬度适中,靠石蜡支持,才能切成薄片。另一方面,材料封埋后,不仅材料外面包着蜡,材料内面所有空隙也都充满着蜡。这样,材料的各部分都能保持原来的结构与位置,切片不致发生破裂或其他变形。
    所用石蜡,质地必须纯净,溶点通常在48~56℃这个范围内,以52℃的石蜡用得更多。在材料不硬,天气不热时,宜用较低熔点的蜡。材料硬,天气热的情形下,宜用高溶点的蜡。
    石蜡选定后,将石蜡切成小块,置瓷皿中加热溶蜡,待石蜡近于全部熔化时,置于温箱中。在进行封埋的全部过程中,石蜡的温度,总以高于溶点2℃为宜,过低石蜡凝固,过高伤害材料。
    材料脱酒精后,要进行浸蜡,再进行埋蜡。浸蜡也宜于渐次进行,一般先用石蜡和二甲苯的混合液浸蜡,再用纯石蜡换一、二次,每次的时间,视材料大小而定,通常每次半小时,材料大,时间必须加长。在浸蜡的过程中,须注意温度,不能超过2℃以上。浸蜡后,须将材料封埋在蜡块中,通常以磅纸折成纸盒(如图所示)。在盒内底上,用软铅笔反书材料及日期等,然后把蜡倒入盒内,将材料移入纸盒中,依将所要切的方向,妥善排列,再以两手平持纸盒,移至冷水中,用口在蜡面上吹气,促其凝结,待蜡面凝成簿层时,将纸盒全部沉入。水冷凝后,将纸撕去,即获蜡块,至此埋蜡完成。
    折纸盒按下列顺序折叠:
    (1) 折AA'及BB';
    (2) 折CC'及DD';
    (3) 折CE'与AE'、向外夹出EE'。同样折出FF',GG'及HH';
    (4) 使CE'E与E'IE两三角形相叠,并沿E'C和EI重叠的折痕向后转折。同样折其余三只角;
    (5)折RIJF向外,同样折出GKLH,即折成所需的纸盒。


    (六)切片
    石蜡切片,用旋转切片机。一个旋转切片机,可分三个部分,一个是安装切片刀的部分,有调节刀片斜度和固着刀片的螺旋。一个是安装材料的部分,也有螺旋可以调节材料的位置。另一个是操纵在旋转中向前推进的部分,控制着切片的厚薄,是比较重要而复杂的部分。
    切片步骤:
    1.先将冷凝的蜡块,切成小块,粘固在小木头上。
    2.安装切片刀,刀的斜度,非常重要,最好先切除的蜡块试刀,以确定刀的斜度,一经调度适合后,就不要随便变动,以免每次试刀的麻烦。
    3.修整蜡块,刀片斜度调好后,将刀片移近蜡块,使小蜡块的下边与刀锋平行,然后把它固定,再转下蜡块.呈矩形才行。只有平整的蜡块,才能切出平整的蜡带。
    4.最后根据需要,调整控制切片厚度的机制。调度后,把它固定下来。上述四步骤完成后,就可进行切片,将切出的蜡带,平展于盒内以供粘片。
    (七)粘片
    材料切成薄片后,须将切片粘在玻璃片上,加热展开,这叫粘片。所用载玻片必须清洁才能使用。粘片时,需把胶液(或称粘贴剂)置簿玻片上,再取切片,浮置胶液上,然后置烘片台上,使切片展开烫平,材料不现皱纹为度。最后将切片依次排好,用滤纸吸去多余水分,同时以记号笔在玻片上编号,放入温箱中烘干,温度30~40℃约1小时即干。常用的胶液有下列三种:
    (1) 明胶液:这是粘片最常用的胶液,简便优良,配法是100毫升纯水中,加明胶4毫克,加热熔化,过滤即得。

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