PEG法：
取材（1、从绿色叶片上分离得到的原生质体。2、来源于同种或不同种的细胞悬浮培养物上分离出的无色原生质体）－这样异核体和母体就可分辨开。
→分别取在含有13％甘露醇的CPW上悬浮培养的原生质体（密度2×105）4mL，混和在100g的转速下离心10min，将原生质体放入0.5％基质→加入30％（w/v）PEG 2mL，使原生质体的外膜不稳定，放置10min→每隔5min加入原生质体培养基稀释PEG以促进原生质体融合。每次稀释后轻微摇动原生质体就会重悬浮→混和物在100g下离心10min，离心后在不含PEG的培养基中清洗→离心，在相同的培养基上重悬浮。
PEG法的缺点：有毒，融合率低：不超过1％
对称融合：父母均未处理，对后代贡献一样。
不对称融合：父母本在后代中贡献不同，射线处理，化学处理
IOA（不影响核的分裂而影响细胞质分裂）
★胞质杂种：利用原生质体融合技术，使两种不同来源的核外遗传成分（细胞器）与一个特定的核基因组结合在一起，就形成胞质杂种。
体细胞杂种和胞质杂种的鉴定方法：形态学，细胞学，分子遗传学。
★园艺植物脱毒：
热处理脱毒：
原理：在高于正常温度下，植物组织中的很多病毒可被部分或完全钝化，而很
少伤害甚至不伤害寄主组织。
方法：热水处理（对休眠芽效果好），热空气处理（对活跃生长的茎尖效果好）
热空气处理方法：空气温度35-40℃，持续时间：随处理对象不同而变化，几分钟-几星期。
注意点：不能一下子放入高温中，要逐步加温使之适应。并保持湿度和光照。
局限性：1、并不是所有的病毒都对热处理敏感
2、对等径和线状的病毒及类菌质体引起的病害是有效的。
3、热处理后只有一小部分植株能够存活
★茎尖分生组织：指茎的最幼龄叶原基上方的一部分，最大直径约100μm，最大长度为
250μm。
★茎尖：由顶端分生组织及其下方的1-3个叶原基一起构成的。
★茎尖培养脱毒：
原理：病毒在植物体内的分布是不均匀的，在受感染的植物中顶端分生组织通常不含或仅含低浓度的病毒，其它的植物组织离茎尖的距离越远则病毒含量越高。
影响茎尖培养脱毒效果的因素：培养基，外植体大小（脱毒效果跟外植体大小呈负相关，茎尖的成活率与茎尖大小呈正相关），贮存条件（光照培养优于暗培养），外植体的生理状态（活跃生长的芽，顶芽的效果比腋芽好，切割芽的时间）
