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定量PCR简介
作者:未知 来源:基因科技 时间:2005-11-29


    PCR技术是分子生物学发展史上的一个里程碑,它大大简化了基因克隆的步骤,已广泛应用于生物学研究的各个领域。

    PCR反应通过变性、退火、延伸三个循环步骤,使目标DNA片段曾指数扩增。

    因此,PCR系统是一个极其灵敏的信号放大系统,能将极微弱、甚至是单拷贝的基因信号检测出来。

    但是常规的PCR不能反映起始样本中目的基因的含量水平,从而限制了它在临床检测中的应用。

    荧光定量PCR是指通过实时监控PCR体系中的荧光信号,对样本中初始模板进行定量分析的一项新技术。定量PCR可实时检测产物量,通过加入已知浓度的标准样品绘制标准曲线,然后根据待测样品在标准曲线中的位置推算初始模板的浓度。它操作简便,通量高,结果准确可靠,为科研及临床检测工作提供了一种新的思路和方法。


    本公司拥有多台Corbett公司最新的Rotor Gene 3000型荧光定量PCR仪,以该型PCR仪作为平台,成功地开发出了乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)荧光定量检测试剂盒。


    Rotor Gene 3000采用独特的离心式设计,反应过程中样品以500 rpm的速度旋转,能保证样品间具有极高的温度均一性(±0.01ºC),从而大大提高了反应的稳定性。


    可同时检测FAM、JOE、ROX和Cy5等4种荧光信号,适应于多个目标基因的复合检测。

    Rotor Gene 3000型荧光定量PCR仪的主要参数:

    Excitation Source: 470nm, 530nm, 585nm, 625nm
    LED high power diodes
    Detection Filters: 510nm, 555nm, 610nm band-pass
    660nm, 585nm, 610nm high-pass filters
    Fluorophores Detected: Sybr-Green I, FAM, TET, JOE, VIC, HEX, ROX, TAMRA,
    CY3, CY3.5, CY5, CY5.5, Oregon Green™,
    CAL Red™, Red 640, Texas Red
    Sample Capacity: 36 x 0.2ml Standard Micro-tubes
    72 x 0.1ml Strip tubes
    Heating/Cooling Rate: 2.5°C/second (tube temperature)
    5.0°C/second (air temperature)
    Temperature Uniformity: +/- 0.01°C
    Temperature Accuracy: +/- 0.5°C
    Temperature Precision: +/- 0.1°C
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