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常见食[药]用菌的3种总DNA提取方法比较研究
作者:未知 来源:本站原创 时间:2005-11-29

    1.5 DNA电泳检测

        取4μL DNA溶液,经1.5%琼脂糖凝胶电泳检测,凝胶电泳图象分析系统分析电泳结果及摄取图象。

    1.6 DNA RAPD分析

        以上述DNA为模板,25μL反应体积,经过筛选选定随机引物序列为CCGAATTCCC,反应程序如下:94℃ 2min后,按94℃变性1min,38℃退火2min,72℃延伸1min,进行42个循环,最后72℃延伸15min。RAPD产物用琼脂糖凝胶水平电泳法进行检测。

    2 结果与分析

    2.1 DNA 紫外分析

        15种食(药)用菌经过3种方法提取DNA后,分别进行紫外分光光度计测定,结果见图1所示。从图中可以知道15种食(药)用菌DNA的紫外检测结果总体看来数值较不正常,主要表现在如下几个方面:一、OD260/280一般不在1.8-2.0之间,甚至出现乱值,如灵芝孢子在QIAGEN试剂盒法和食品DNA试剂盒法中为负值、草菇在QIAGEN试剂盒法中为大于20等;二、OD260/230值虽然没有象OD260/280一样出现乱值的情况,但数值普遍偏小,本研究中除了QIAGEN试剂盒法的值较高,大部分在1左右,均值为1.116,食品DNA试剂盒法的16种食(药)用菌样品中有15种小于1,均值为0.578,CTAB法的值也大部分小于1,均值为0.639;三、DNA浓度很低,很少有100μg/ml以上。

     

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