三．实验材料
仪器设备
1．酒精灯、100ml三角烧瓶，9厘米培养皿；
2．镊子、剪刀、解剖针；
3．双筒解剖显微镜；
4．光照培养箱或温室；
材料和试剂
1．材料 烟草无菌苗、豌豆幼苗。
2．试剂
（1）MS培养基，植物激素：NAA、6-BA等；
（2）饱和漂白粉液（次氯酸钠）；
（3）70%酒精、100%酒精、酒精棉球；
（4）无菌水
四．实验步骤
每组一瓶烟草无菌苗，请细心操作，以免污染。
（1） 在实验台上，点着酒精灯，将双手用酒精棉球擦拭消毒，打开生长好无菌烟草苗的三角瓶，三角瓶的瓶口使用前后需在酒精灯外焰上烧过灭菌。
（2） 用灭菌的镊子轻轻捏出1株幼苗，用灭菌的剪刀将无菌苗剪成0.5-1厘米的小段，要求每段至少包含一个生长点，直接剪入盛有MS培养基的三角瓶中，每一个切段必须直接接触培养基，三角瓶口重新烧过灭菌，并重新封好口。
（3） 在光照培养箱中15~25℃，16小时光照条件下培养4周，可长成完整植株，能用于田间移栽。
2．豌豆苗的茎尖培养
⑴ 取发芽6天的豌豆幼苗10株，简取1厘米左右的茎尖，浸入70%的酒精中1分钟，再浸入饱和次氯酸钠溶液中消毒15分钟，（此步以后要求无菌）用无菌水中冲洗5次，在灭菌的滤纸上吸干水分，放入灭菌的培养皿中。
⑵ 在双目解剖镜下，用灭菌的解剖针剥去幼叶露出生长锥，用灭菌的解剖针挑取带着两至三个叶原基的生长锥。
⑶ 将挑好的茎尖移到MS+10.7μmol/L萘乙酸(NAA)+4.4μmol/L 6-苄基腺嘌呤（6-BA）的培养基上诱导愈伤组织形成，用封口膜将培养皿封好。
[4]在恒温培养箱中，26℃下,培养六周，形成愈伤组织，经继代后，可用于生根培养。
