（二）细胞融合
1．细胞融合前准备
（1）骨髓瘤细胞系的选择：
骨髓瘤细胞应和免疫动物属于同一品系，这样杂交融合率高，也便于接种杂交瘤在同一品系小鼠腹腔内产生大量McAb。
常用的骨髓瘤细胞系见表2-4。
表2-4用于融合试验的主要骨髓瘤细胞系
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名 称 |
来 源 |
耐 受 药 物 |
Ig链 |
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H L | |||
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P3/X63-Ag8(X63) |
BALB/C骨髓瘤MOPC-21 |
8-氮鸟嘌呤 |
r1 K |
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P3/X63-Ag8.653(X63-Ag8.653) |
P3/X63-Ag8 |
8-氮鸟嘌呤 |
－ － |
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P3/NSI-1-Ag4-1(NS-1) |
P3/X63-Ag8 |
8-氮鸟嘌呤 |
－ K（不分泌型） |
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P3/X63-Ag8.Ul(P3Ul) |
（X63×BALB/C脾细胞）杂交瘤 |
8-氮鸟嘌呤 |
－ － |
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SP2/0-Ag14(SP2/0) |
（X63×BALB/C脾细胞）杂交瘤 |
8-氮鸟嘌呤 |
－ － |
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F0 |
BALB/C骨髓瘤 |
8-氮鸟嘌呤 |
－ － |
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S194/5.XXO.BU.1 |
P3/X63-Ag8 |
5-溴脱氧尿嘧啶核苷 |
－ － |
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MPC11-45.6TG1.7 |
BALB/C骨髓瘤MPC-11 |
6-巯鸟嘌呤 |
r2b K |
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210.RCY3.Ag |
LOU大鼠骨髓瘤R210 |
8-氮鸟嘌呤 |
－ K |
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GM15006TG-A12 |
人骨髓瘤GM1500 |
6-巯鸟嘌呤 |
r1 K |
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U-266AR |
人骨髓瘤U-266 |
8-氮鸟嘌呤 |
ε λ |
骨髓瘤细胞的培养可用一般的培养液，如RPMI1640，DMEM培养基。小牛血清的浓度一般在10%～20%，细胞浓度以104～5×105/ml为宜，最大浓度不得超过106/ml。当细胞处于对数生长的中期时，可按1：3～1：10的比例传代。每3～5天传代一次。细胞在传代过程中，部分细胞可能有返祖现象，应定期用8-氮鸟嘌呤进行处理，使生存的细胞对HAT呈均一的敏感性。
（2）饲养细胞：在组织培养中，单个或少数分散的细胞不易生长繁殖，若加入其它活细胞，则可促进这些细胞生长繁殖，所加入的这种细胞数被称为饲养细胞。在制备McAb的过程中，许多环节 需要加饲养细胞，如在杂交瘤细胞筛选、克隆化和扩大培养过程中，加入饲养细胞是十分必要的。常用的饲养细胞有：小鼠腹腔巨噬细胞（较为常用）、小鼠脾脏细胞或胸腺细胞。也有人用小鼠成纤维细胞系3T3经放射线照射后作为饲养细胞。饲养细胞的量为一般为2×104或105细胞/孔。
