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光线对巨噬细胞吸收钙的效果
作者:S.R Young, M. Dy… 来源:生物秀 时间:2005-11-23

    每个培养皿的细胞和培养液暴露于位于培养细胞表面上方1cm的光源下或给予假照射。每种暴露的情况重复进行6次。

        照射之后经过五分钟,将细胞以1000rpm离心旋转一分钟。细胞在磷酸盐缓冲液(PBS) 中,用重新悬浮与离心力冲洗一次,也在EDTA(0.1%W/V) 中冲洗一次。细胞之后在0.1ml的蒸馏水中重新悬浮。然后将100ul容量的细胞悬浮加到包含4ml的光相安全闪烁液体(LKB) 的塑料玻璃瓶。然后利用Packard三倍的碳酸液体闪烁计数器,来分析每一个玻璃瓶45Ca的活动约十分钟的时间。

    统计分析

        每个实验群组和假的照射群组,利用Student氏的配对t检定加以比较。

    结果

    能源密度调查    

        结果以图形显示于图1,在所测试范围中,45Ca剌激的最大值出现于吸收能源密度范围4-8J/c㎡。这些水平都显著的和控制组不同(p<0.01) 。4-8J/c㎡的刺激显著大于2 J/c㎡(p<0.05) 。在8 J/c㎡以上的能源密度,45Ca的吸收减少到和控制组假照射水平无差异的阶段。

    频率调查

        结果以图形表示在图2,在所测试范围中,所有频率都可增加45Ca的吸收至在控制组水平以上(p<0.01)),最有效的频率是16Hz,产生的增加显著大于4.56, 700和5000Hz(p<0.01)。

    波长调查

        结果以图形显示于图3,在所测试范围中,660, 820和870 nm增加45Ca的吸收达控制组水平之上(p<0.01),然而,在这三个波长有显著的差异 (p<0.05),暴露于880 nm细胞的45Ca水平则和那些控制组水平无显著差异。

    讨论

        细胞对钙的每分钟浓度的改变极为敏感。在细胞之外的钙浓度大约比细胞溶质13大10000倍。这个浓度差异是藉细胞薄膜对钙的相对不渗透性,和位在细胞薄膜中钙的抽取活动来维持。当一个细胞经由外在的讯号而受刺激,钙的流入可以暂时增加到正常速率的4倍。当细胞溶质中的钙水平提高,特定蛋白质如携钙素和离子结合会有增加。携钙素与钙的结合引起蛋白质结构的改变。这种结构的改变,让细胞中的钙和携钙素复合物与其它蛋白质交互作用并改变其功能活动。如果外部的刺激被移除则钙流入率降低,造成细胞中钙的减少进而刺激已结合的钙,从结合的蛋白质中分离,所以原始的构造被回复而系统停止。因此,细胞内的钙浓度改变可以作为启动与停止的开关。

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