细胞培养 类似巨噬细胞线的U-9377繁殖在RPMI 1640中(流体实验室)。培养液使用1%盘尼西林、链霉素(GIBCO)、及10%热钝化小牛胚胎血清(GIBCO)。大约每2天再次培养细胞。细胞在50毫升Nunc培养烧瓶里。每一培养皿有9毫升的培养液与细胞。细胞于5%CO2大气压力、温度37℃下繁殖。每一融合的培养皿大约有9 x 106 细胞数量 钙的吸收 同位素45Ca(Amersham国际股份有限公司)是取自于钙氯化物的水溶液。其特定的活动是2 mG/ml(1.62 mg/ml钙) 。巨噬细胞被加在包含45Ca浓度1uCi/ml磷酸盐缓冲培养液中。细胞的密度是1X106ml。细胞的旋浮物接着转移到消毒过的1ml容量之24个来源培养皿(流体)。 之后每一个器皿,暴露于使用生物疗法3ML装置(Omega全球科技)或者同调或不同调的光照射下。物理的参数如下:主动媒介—砷铝化镓(GaAlAs);点的大小为1cm距离,0.125c㎡; 100%密度光谱频宽(15mW)-5nm(不同调光源),0.01mm(同调光源);脉冲宽18µs,全分散角度-10°(非同调光源),23°平行到接合点平面,和16°垂直接合点平面(同调光源)。 能源密度调查 波长-660nm (N) *;脉频-5000Hz;平均能量输出-15mW;能源密度0,2,4,8,16,或32 J/c㎡;能量密度-120mW/c㎡。 脉频调查 波长-660nm(N);脉频--2.28, 4.56, 16, 36.48, 700或5000Hz;平均能量输输出--15mW;能源密度--2 J/c㎡;能量密度--120mW/c㎡。 波长调查 波长-660(N),820(C)*,870(N)或880(N) ;脉频-5000Hz;平均能量输出-15mW;能源密度-2 J/c㎡;能量密度-120mW/c㎡。*(N)= 非同调;(C)= 同调。 脉频和波长的调查,选择能源密度2 J/c㎡,因为它在Mester等人1的指定范围之内,就某些细胞行为的观点上,具有刺激的效果,在能源密度和脉频的调查上,使用660nm波长因为发现它能最有效的刺激巨噬细胞分泌的活动。2在脉频的调查研究中,所有可设定于生物治疗法3ML雷射上的频率都被加以测试。
光源藉由Photodyne平面反应能量计(PX16E) 加以校准。


