3.4 人血浆中的干扰物质 血浆中通常包含有与IgG反应的抗体。这些异嗜性的抗体可影响夹心免疫分析法,它们在俘获抗体和被标记的抗体间形成桥梁,而错误地导致高分析值。研究表明,15%~40%的病人样本中含有能够干扰检测的抗体。异嗜性抗体能与鼠、兔和牛血清免疫球蛋白发生反应,在大多数情况下,它们与牛IgG的结合最强。在检测中,加入正常的非免疫动物血清吸附异嗜性抗体,常能够消除这种形式的干扰。
3.5 类风湿因子是IgM的自身抗体 Hamilton等的研究说明,IgM类风湿因子与鼠IgG的结合发生于1%的健康献血者和31%的类风湿关节炎病人。然而,也有研究表明,在9.1%的正常献血者中发生了这类结合。这些抗体可造成与异嗜性抗体完全相同的影响,并且他们在对细胞因子检测具有特别意义的类风湿病患者中的浓度极高。
4 精密度
细胞因子免疫分析法的精密度较其生物分析法有较大提高。在要求的浓度范围,免疫分析法的批内变异通常为20%~25%,因此有必要进行2次或3次检测。批间变异甚至可能高于批内变异。许多商品试剂盒适用于测定在相对高范围的细胞因子浓度,但是一些文献报道了很低的、位于标准曲线上精密度极差处的浓度。
5 标准化
目前,重组细胞因子是仅有的标准。这些由细菌产生的细胞因子是非糖基化的,并不包括细胞因子可能存在于血浆中的多种形式。由于样品本身的问题,在检测中,标准与样品可能得不到一致的结果。美国国家生物标准及控制局(NIBSC)提供的一系列标准在一定程度上有助于解决细胞因子检测结果不一致的问题。然而,由于前面所述的原 因,甚至在使用相同的标准时
,不同的测定方法测定相同的样品,仍可能得出极其不同的结果。
综上所述,应认识到在检测细胞因子时,必须考虑到细胞因子的作用具有网络性的特点和上述问题。人们需明确检测方法所测定的细胞因子成分,并考虑其抑制剂和可溶性受体的水平,将生物分析法和免疫分析法结合使用,有可能得到较为可靠的结果。当然,准确,灵敏的检测方法是进行细胞因子研究的首要条件,临床诊断需要相对容易的操作。随着细胞因子在治疗中应用的逐步增加,其检测必将被广泛的使用。
参考文献
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