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血细胞计数标准化和规范化


       
    目前,稳定参考品仍然未定。ACDCPD抗凝血液可作为控制品,室间质评样品和短期校准品。因只能稳定数周,不符合国际参考标准的基本性能。另一方面,固定血细胞能稳定数年,但其密度、变形性、形态和流变性能会影响它们在计数系统中的行为,需形状因子纠正才能与新鲜血有可比性。“形状因子”主要影响红细胞,新鲜红细胞在通过计数系统时,呈纺锤形,而固定红细胞呈铜钱形。但是,计数系统中,新鲜白细胞和血小板保持球形,固定也不影响形态,其形状因子为1.0。稳定胶乳颗粒有同样的局限性,优点是可根据颗粒的特定大小生产单一的颗粒,且标准差极小。ICSH和欧盟参考BCR标准局建立了3批特别精度的胶乳颗粒,在显微镜下,用经校准标尺测得直径分别为2.23,4.89.445µm,呈球形,计算体积为5.8,58441fL,此物质能直接溯源到一级长度计量标准。在颗粒计数仪中,形状因子由真实体积和测定体积的差异得出。结果见表2

    2 参考仪器和常规仪器的形状因子计算

    计算体积(fL

    参考仪器(fL

    常规仪器(fL

    形状因子(fL

    5.8

    5.74

    5.67

    1.0

    58

    76

    76

    1.3

    441

    超出范围

    超出范围

     

        理论上,胶乳制剂能用于校准一级参考仪器,然后用于新鲜血液或稳定血液的定值。以此调节所有计数仪,给出可比结果,所用校准品必须溯源到一级参考标准。国际上,测量结果的溯源链模式如下图左(图略)。在血液细胞计数方面,生产厂家的校准品溯源链模式如下图右(图略)

    (一)仪器的校准方法

       
    现代血液分析仪的校准在操作手册中都有严格的方法,在校准前,必须确认仪器分析性能,包括精度、线性、交叉污染等指标。采用新鲜血或稳定血液校准时,应考虑不同的影响因素,分述如下。

    1.
    新鲜血液作为校准品
       
    以新鲜血液作为校准品,其值必须用参考方法或选择性方法来确定。尤其是血液的新鲜程度,将明显影响校准结果。其次,根据校准准确度要求,为了减少随机误差,达到校准,必须采用足够数量的标本。表3显示了标本数量和校准准确度之间关系。

    3 全血校准:达到预计准确度的最少数量和标本要求

    Parameter

    Desired accuracy(%)

    Number of specimens

    Characteristics

    Red blood count

    1

    5

    RBC between 2000×109and 6000×109

     

    2

    2

     

     

    3

    1

     

    White blood count

    2

    11

    WBC between 3.0×109and 40×109

     

    4

    3

     

    Packed cell volume

    2

    10

    Oxygenate fully

     

    3

    5

    MCHC normal

     

    4

    3

    MCV normal

    Hemoglobin

    1

    7

    WBC less than 40×109

     

    2

    2

     

     

    3

    1

     

    Platelet count

    2

    15

    MPV greater than 5.5 fl

     

    4

    4

     

     

    6

    2

     

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