1.2 盖玻片的处理
1 把盖玻片放在陶瓷或金属架上，相互不要接触。
2 在装有自来水的烧杯中，快速浸泡和冲洗。
3 在纸巾上把架子控干，再放入盛有0.1mol/L HCl的烧杯中，温育过夜。
4 用自来水冲洗盖玻片，每次10min，共5次。
5 把架子浸入70%的乙醇中，温育60min。
6 用去离子水短暂冲洗，放在纸巾上控干。
7 在室温下自然干燥30min。
8 在220～250℃烤6 h。
1.3 显微注射用细胞的准备
1 在注射前一天，把细胞铺到直径为10～15mm的盖玻片上，每个盖玻片250～1000个细胞。
2 在注射前，把带有需要注射细胞的盖玻片转移至新的组织培养皿中，迅速用金刚石笔在盖玻片上划一个十字或一个圆圈标记（金刚石笔使用前用70%乙醇冲洗，并在超净台中用火焰烧一下），然后加入3ml有缓冲液的培养基。
2．显微注射操作过程
2.1 针头装液
1 使用无菌的微量加样器从微注射针头的后部加入0.5～1μl的注射样品。
2 使用玻璃毛细管拉出毛细管针头，里面有与毛细管平行的细丝，有利于液体从后部向针头方向运动。只需在针头后部浸入1mm深度，不需使用手指或其他东西接触，就足以使少量的样品到达针尖部。
2.2 针头定位
1 将装液后的针头的游离端安在连接器上，然后旋紧连接器以固定针头，再将其固定到微操作仪的托针管上。
2 把载有待注射细胞的盖玻片转移到里面有缓冲培养基的平皿中，将其放在中央。
3 将培养皿放在显微镜载物台上，尽量将盖玻片上所画圆圈的一个对准光照的中心区，这时光的亮度最好。
4 用低倍物镜对准细胞调焦。
5 将针头推入视野中心，在视野中针头呈阴影状。
6 轻轻的落下针头，直至到达培养基中后停下。
7 通过显微镜观察，移动针头，必要时调整微操作仪，直到针头的阴影在视野的上方。然后确定针头的位置，使其约处在视野中心。
8 轻轻下调针头，直到针头变得清晰一些
2． 调到工作放大倍数，调准细胞焦距，找到针尖。
3． 如果找不到，重新使用低倍镜，尽量将针头调到视野的中心，重复上述的步骤。
10 小心下调针尖，直到其完全聚焦。
1.3 显微注射的操作
2.3.1 手动细胞核内注射
1 使用最低放大倍数（50×），把焦距对准位于盖玻片上注射标记区域的细胞平面上。用肉眼将注射针头对准到照度最亮处的中心，降下针头，直到进入培养基。把针头调入到视野的中心，轻轻放下针头，直到看清楚为止。然后将放大倍数调至工作倍数，即320×，对准细胞表面调焦。将针头调整到中心，下降针头，对准焦距。移动显微镜载物台，使针尖对准细胞核或核周的胞质。
2 小心落下针尖，使其进入细胞核或核周的胞质。
3 使用注射器施加注射压
4 轻轻上提针头，直到离开细胞。
5 移动显微镜载物台，找到下一个细胞，重复2～4步骤。
