4．实 验 方 法 
Carnoy液固定 
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95%酒精（2次）每次20-30min 
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100%酒精2次(30 min, 40 min) 
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二甲苯透明 
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石腊包埋 
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切片贴片 
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二甲苯I(20 min) 
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二甲苯II(10 min) 
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100%酒精5min 
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95%酒精5min 
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85%酒精5min 
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70%酒精5min 
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50%酒精5min 
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30%酒精5min 
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蒸馏水5-10min 
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1 mol/L HCl的染色缸内（清洗一下） 
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温浴至60℃的1 mol/L HCl溶液中水解8 min 
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取出标本，放入室温1 mol/L HCl溶液 
（注意: 这个步骤非常重要，必须用1 mol/L稀盐酸冲洗，因为它可以洗去贴在切片上的试剂的痕迹。如用蒸馏水冲洗，则试剂本身也可以水解，所释放出的碱性品红，可以使切片内一切嗜碱性物质皆染色从而引起严重的错误。若切片较厚，可延长其水解时间，而且每次均需更换洗涤剂） 
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蒸馏水冲洗3次（使水解停止） 
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Schiff试剂中染色40min 
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用亚硫酸水洗3~5次(以洗去多余的非特异性色素及扩散的染料) 
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流水冲洗5 min 
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蒸馏水洗片刻 
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1%亮绿复染数秒钟 
（注意: 复染时间切忌过长，以免染色过深，影响对DNA的观察） 
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水洗脱水封片 

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