1. 细胞融合
将上述剩余的两种亲本细胞的混合液以1500rpm/min的转速离心5分钟，去掉大部分上清液，留下0.1ml液体将沉降的细胞分散于其中，制成细胞悬液。轻轻摇动试管、并逐滴加入后在37℃下预热的40％的聚乙二醇溶液0.4ml。将此悬液置于37℃水浴中温育90秒钟后，缓慢的加入无血清培养液5ml,以中止PEG的作用。此后盖塞，并慢慢的倾转离心管4～5次。以1500rpm/min离心5分钟。去除大部分上清液，留下约0.1ml液体悬浮细胞。在此悬浮液中加入5ml完全的E-MEM培养液（系指加入血清的培养液），混匀后，取出0.4ml悬液作观察用
2. 细胞培养
将细胞作4倍稀释，混匀，以每孔0.5ml分装于24孔培养板或每孔0.1ml分装于96孔培养板，置于37℃，5％CO2的培养箱中培养。
3. 制片
   将步骤1和2所留下的两种亲本细胞的混合液和融合后的细胞悬液分别涂片（每组涂3张），迅速干燥，甲醇固定，Giemsa染液进行染色、水洗、干燥。镜检，观察融合细胞。或者将上述两种细胞悬液分别滴于载玻片上，加盖盖玻片后，在相关显微镜下直接进行观察。
4. 观察
先观察对照组，从形态上识别两种亲本细胞并观察其中有无融合细胞。此后观察实验组，找出融合后的多核细胞，双核细胞，并区分同种融合与异种融合细胞。
（二）   原生动物细胞融合
原生动物四膜虫的个体较大，四周有很多纤毛，有大小两个细胞核，眼虫个体比四膜虫小，头部具有叶绿体。本实验采用这两种亲本细胞仅是为了便于制备大量细胞和便于识别异型多核细胞。
1.混合两种亲本细胞
向尖头离心管内分别加入眼虫悬液、四膜虫悬液各2ml，混和细胞。取出混合液0.2ml，滴片观察两种亲本细胞。
2. 细胞融合
将上述两种细胞的混合液以1000转/分的转速离心2分钟，快速倒去或吸去上清液，剩下0.1－0.2ml液体，摇动离心管，分散细胞，制成细胞悬液。逐滴加入37°C，40％的聚乙二醇溶液0.4－0.8ml。离心管置37°C水浴90秒钟，缓慢加入4°C、PBS液4ml，以终止PEG的作用。盖橡皮塞，缓慢倾转离心管4－5次。1000转/分，离心2分钟，除去上清液，留下0.1－0.2ml液体悬浮细胞。加入PBS液3ml，混匀细胞，滴片观察。
3.观察
先观察混和细胞，以识别两种亲本细胞。然后观察融合细胞，并画出不同类型的融合细胞。

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