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实用哺乳动物细胞培养手册
作者:未知 来源:本站原创 时间:2005-11-17

    (4)抗生素消毒:主要用于培养用液灭菌或预防培养物污染。
    细胞培养常用物品
    细胞培养
    目前,市场上可提供干粉培养基和液体培养基。干粉培养基需使用者自己配制并灭菌,其优点是价格便宜。缺点是配制过程繁琐,质量不易控制。液体培养基是由专业产家按标准规模化生产,不仅质量得到保证,而且使用十分方便。常用的培养基种类及其应用见下表:

    血清
    平衡盐液体
    PBS(Phosphate-Buffered Sallines)
    DPBS(Dulbecco’s Phosphate-Buffered Sallines)标准型


    消化液:
    分离组织和分散细胞。常用的有胰蛋白酶和二乙胺四乙酸二钠(EDTA)两种溶液。可以单独使用,也可以混合使用。

    (1)胰蛋白酶溶液
    胰蛋白酶(简称胰酶)是一种黄白色粉末,易潮解,应放置冷暗干燥处保存。目前应用的胰蛋白酶主要来自牛或猪的胰腺。胰酶的主要作用是使细胞间的蛋白质水解,使细胞相互离散。胰酶对细胞的分离作用与细胞的种类和细胞的特性有密切关系。一般来讲,胰酶浓度大、作用温度高、作用时间长,对细胞分离能力也大,但超过一定的限度会损伤细胞。胰酶溶液在pH8.0,温度为37℃时,作用能力最强。注意:钙离子、镁离子和血清蛋白的存在会降低胰酶活力。因此,胰酶溶液常用无Ca2+ 、Mg2+的D-Hanks’ 平衡盐溶液配制成0.25%溶液。消化细胞时,加入一些血清或含血清的培养液,或胰蛋白酶抑制剂能终止胰蛋白酶对细胞的消化作用。

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