4.实 验 方 法
4.1 染色体标本的制做 
取小白鼠注射秋水仙素 
↓14~16h后 
断头法杀死，取睾丸洗净血污 
↓ 
移入KCl的低渗溶液内将睾丸剪碎(呈乳白色) 
↓铜网过滤至刻度离心管中 
加入KCl低渗溶液于37℃水浴中低渗处理30min（使细胞膨胀） 
↓ 
800~1000r/min离心8min 
↓轻轻地去除上清液 
加入新配制的Carnoy’s固定液，立即用吸管轻轻将细胞吹散 
↓ 
室温固定8min 
↓ 
800~1000r/min离心8min 
↓弃去上清液 
加入新制Carnoy’s固定液，用滴管轻轻将细胞吹散，制成细胞悬液 
↓ 
取出预冷的干净载玻片，以10~15cm高度滴加细胞悬液（细胞胀破） 
↓ 
立即吹打载玻片 
↓ 
多余的水分吸去后用文火烤干或空气干燥 
↓ 
稀释Giemsa原液 
Giemsa染色（倒置染色法，后有说明）30min 
↓ 
用流水冲洗标本载玻片 
↓ 
文火烤干显微观察 
↓ 
选择染色好的分裂相染色体封片后油镜下进行显微照相 
[附]：倒置染色法――在玻璃板上用废旧载玻片作支架, 使标本载玻片的标本面向下放置到支架上, 在玻璃板和标本载玻片之间滴加Giemsa染液，目的一可以节省染料，二可以避免染液快速挥发，三可以防止染色颗粒沉淀，影响观察。在操作时应注意，多个样品同时染色应摆放紧密，不要有间隙；滴染液时应尽量慢，不要有气泡，以免部分染色体不被着色。 

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