3.实 验 用 品
3.1 材料 小白鼠,蟾蜍或青蛙
3.2 器材
离心机、恒温水浴,显微镜、刻度离心管(10ml)、注射器(1ml)、载玻片、烧杯(400ml)、量筒(100ml)、试管架、镊子、手术剪和手术镊,滴管,10ml小烧杯,试管架,染色用玻璃板, 香柏油,擦镜纸,直尺,复印的染色体标本图。
3.3 试剂
3.3.1. 秋水仙素: 称取秋水仙素10mg加10ml的注射用水,即得0.1%的秋水仙素液, 以此作为原液。在使用时,需将原液稀释50倍,即取0.1ml原液,加4.9ml注射用水,稀释后秋水仙素的浓度为 20?g/ml。
3.3.2. 生理盐水: 哺乳动物及人类为0.9%的NaCl溶液,两栖类为0.7%的NaCl溶液。
3.3.3. Carnoy’s固定液: 甲醇:冰醋酸为3:1, 必须现用现配。
3.3.4. Giemsa染液的配制:
吉姆萨粉(Giemsa stain) l.0g
甘油(AR) 66ml
甲醇(AR) 66ml
将Giemsa粉放入研钵中,先加入少量甘油,研磨至无颗粒为止,然后再将全部甘油倒入,放56℃温箱中2h后,加入甲醇,将配制好的染液密封保存棕色瓶内(最好于0~4℃保存)。
3.3.5. 磷酸缓冲液:
1/15 mol/L Na2HPO4•12H2O: 2.39g 溶于100ml双蒸水中。
1/15 mol/L KH2PO4 0.907g 溶于100ml双蒸水中。
取1/15 mol/L Na2HPO4•12H2O液80ml、1/15 mol/L KH2PO4液 20ml混合即为pH=7.38之磷酸缓冲液。
如用无水Na2HPO4配制磷酸缓冲液,还可用以下方法配制;
A液:
Na2HPO4 9.47g
双蒸水 1000ml
B液:
KH2PO4 9.06g
双蒸水 1000ml
根据下表中所示比例即可配制出不同pH值的磷酸缓冲液。
表1 磷酸缓冲液配制比例
pH值 A液(ml) B液(ml)
5.8 7.8 92.2
6.0 12.0 88.0
6.4 26.5 73.5
6.6 37.5 62.5
6.8 50.0 50.0
7.0 61.1 38.9
7.2 71.5 28.5
7.4 80.4 19.6
3.3.6. 0.3% KCl水溶液(低渗液)。


