中国生化及分子生物学学会
植物病虫害生物学国家重点实验室
目 录
前 言I
第一部分 核酸提取1
实验一：基因组 DNA 提取1
实验二：总 RNA 提取3
第二部分 亚克隆技术8
实验三：质粒 DNA 提取8
实验四：DNA 片段的酶切9
实验五：DNA 片段的酶修饰
脱磷12
实验六：DNA 片段的连接13
实验七： DNA 片段的回收15
第三部分 PCR 技术18
实验八：PCR 产物的克隆技术18
八．1：T
载体构建 19
八．2：PCR 产物的 T
载体克隆20
八．3：PCR 产物的平端克隆技术21
实验九：RTPCR
技术21
实验十：定量 PCR 25
第四部分 文库构建技术29
实验十一：mRNA 的提取及纯化 29
实验十二：cDNA 文库构建技术cDNA
链的反转合成32
实验十三：1,cDNA 文库构建技术cDNA
链的连接、包装及转染34
实验十三：2,RACE 技术36
第五部分 核酸杂交技术40
实验十四：DNA 探针的标记40
实验十五：Southern 杂交技术44
第六部分：基因及基因产物检测技术48
实验十六：DNA 的测序技术48
实验十七：基因表达 1，基因的体外快速翻译53
2，基因的诱导表达54
实验十八：报告基因的应用57
实验十九：Western 杂交技术58
第七部分 基因表达轮廓技术67
实验二十：DDPCR
技术73
实验二一：SSH 技术74
第八部分：遗传转化技术75
实验二二：感受态细胞制备75
实验二三：重组基因的转化及筛选77
实验二四：原生质体分离78
实验二五：农杆菌转化技术79
第九部分：分子标记技术80
实验二六：RFLP 技术86
实验二七：RAPD 技术86
实验二八：AFLP 技术87
实验二九：SSR 技术89
第十部分：细胞技术89
实验三十：细胞凋亡89
十一：附录 一92
