目录
序 …………………………………………………………………………………………………… ⅷ
致谢 ………………………………………………………………………………………………… ⅸ
第1 章 总则 …………………………………………………………………………………… 1
引言 ……………………………………………………………………………………………… 1
第一部分 生物安全指南
第2 章 微生物危险度评估 ………………………………………………………………………… 7
信息有限的标本 ………………………………………………………………………………… 7
危险度评估与遗传修饰微生物 ………………………………………………………………… 8
第3 章 基础实验室——一级和二级生物安全水平 ……………………………………………… 9
操作规范 ………………………………………………………………………………………… 9
实验室的设计和设施 ………………………………………………………………………… 11
实验室设备 …………………………………………………………………………………… 13
健康和医学监测 ………………………………………………………………………… 15
培训 …………………………………………………………………………………………… 15
废弃物处理 …………………………………………………………………………………… 16
化学品、火、电、辐射以及仪器设备安全 ……………………………………………………… 17
第4 章 防护实验室——三级生物安全水平 …………………………………………………… 18
操作规范 ……………………………………………………………………………………… 18
实验室的设计和设施 ………………………………………………………………………… 18
实验室设备 …………………………………………………………………………………… 19
健康和医学监测 ………………………………………………………………………… 19
第5 章 最高防护实验室——四级生物安全水平 ……………………………………………… 22
操作规范 ……………………………………………………………………………………… 22
实验室的设计和设施 ………………………………………………………………………… 22
第6 章 实验动物设施 …………………………………………………………………………… 25
动物设施——一级生物安全水平 …………………………………………………………… 26
动物设施——二级生物安全水平 …………………………………………………………… 26
动物设施——三级生物安全水平 …………………………………………………………… 27
动物设施——四级生物安全水平 …………………………………………………………… 27
无脊椎动物 …………………………………………………………………………………… 28
实验室生物安全手册
iv
第7 章 实验室∕动物设施试运行指南 ………………………………………………………… 29
第8 章 实验室∕动物设施认证指南 …………………………………………………………… 31
第二部分 实验室生物安全保障
第9 章 实验室生物安全保障的概念 …………………………………………………………… 41
第三部分 实验室设备
第10 章 生物安全柜 ……………………………………………………………………………… 45
Ⅰ级生物安全柜 ……………………………………………………………………………… 46
Ⅱ级生物安全柜 ……………………………………………………………………………… 46
Ⅲ级生物安全柜 ……………………………………………………………………………… 49
生物安全柜的通风连接 ……………………………………………………………………… 49
生物安全柜的选择 ………………………………………………………………… 49
实验室中生物安全柜的使用 ………………………………………………………………… 50
第11 章 安全设备 ………………………………………………………………………………… 53
负压柔性薄膜隔离装置 ……………………………………………………………………… 54
移液辅助器 …………………………………………………………………………………… 54
匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器 ………………………………………………………… 55
一次性接种环 ………………………………………………………………………………… 55
微型加热器 …………………………………………………………………………………… 55
个体防护装备和防护服 ……………………………………………………………………… 55
第四部分 微生物学操作技术规范
第12 章 实验室技术 ……………………………………………………………………………… 61
实验室中标本的安全操作 …………………………………………………………………… 61
移液管和移液辅助器的使用 ………………………………………………………………… 61
避免感染性物质的扩散 ……………………………………………………………………… 62
生物安全柜的使用 …………………………………………………………………………… 62
避免感染性物质的食入以及与皮肤和眼睛的接触 ………………………………………… 62
避免感染性物质的注入 ……………………………………………………………………… 63
血清的分离 …………………………………………………………………………………… 63
离心机的使用 ………………………………………………………………………………… 63
匀浆器、摇床、搅拌器和超声处理器的使用 ………………………………………………… 64
组织研磨器的使用 …………………………………………………………………………… 64
冰箱与冰柜的维护和使用 …………………………………………………………………… 64
装有冻干感染性物质安瓿的开启 …………………………………………………………… 64
装有感染性物质安瓿的储存 ………………………………………………………………… 65
目录
v
对血液和其他体液、组织及排泄物的标准防护方法 ………………………………………… 65
对可能含有朊蛋白物质的防护 ……………………………………………………………… 66
第13 章 意外事故应对方案和应急程序 ………………………………………………………… 68
意外事故应对方案 …………………………………………………………………………… 68
微生物实验室应急程序 ……………………………………………………………………… 68
第14 章 消毒和灭菌 ……………………………………………………………………………… 71
定义 …………………………………………………………………………………………… 71
实验室材料的清洁 …………………………………………………………………………… 71
化学杀菌剂 …………………………………………………………………………………… 72
清除局部环境的污染 ………………………………………………………………………… 75
清除生物安全柜的污染 ……………………………………………………………………… 76
洗手／清除手部污染 ………………………………………………………………………… 76
热力消毒和灭菌 ……………………………………………………………………………… 76
焚烧 …………………………………………………………………………………………… 78
废弃物处理 …………………………………………………………………………………… 78
第15 章 感染性物质的运输 ……………………………………………………………………… 79
国际运输规定 ………………………………………………………………………………… 79
基本的三层包装系统 ………………………………………………………………………… 79
溢出清除程序 ………………………………………………………………………………… 81
第五部分 生物技术介绍
第16 章 生物安全和重组DNA技术 ……………………………………………………………… 85
生物表达系统的生物安全考虑 ……………………………………………………………… 85
表达载体的生物安全考虑 …………………………………………………………………… 85
用于基因转移的病毒载体 …………………………………………………………………… 85
转基因动物和“基因敲除”动物 ……………………………………………………………… 86
转基因植物 …………………………………………………………………………………… 86
遗传修饰生物体的危险度评估 ……………………………………………………………… 86
进一步的考虑 ………………………………………………………………………………… 87
第六部分 化学品、火和电的安全
第17 章 危害性化学品 …………………………………………………………………………… 91
暴露途径 ……………………………………………………………………………………… 91
化学品的储存 ………………………………………………………………………………… 91
关于不相容化学品的一般原则 ……………………………………………………………… 91
化学品的毒性作用 …………………………………………………………………………… 91
爆炸性化学品 ………………………………………………………………………………… 92
化学品溢出 …………………………………………………………………………………… 92
实验室生物安全手册
vi
压缩气体和液化气 …………………………………………………………………………… 92
第18 章 其他实验室危害 ………………………………………………………………………… 94
火的危害 ……………………………………………………………………………………… 94
电的危害 ……………………………………………………………………………………… 95
噪声 …………………………………………………………………………………………… 95
电离辐射 ……………………………………………………………………………………… 95
第七部分 安全组织和培训
第19 章 生物安全官员和安全委员会 ………………………………………………………… 101
生物安全官员 ………………………………………………………………………………… 101
生物安全委员会 ……………………………………………………………………………… 101
第20 章 后勤保障人员的安全 ………………………………………………………………… 103
工程和建筑物的维护保养 …………………………………………………………………… 103
清洁（内务）保养 ……………………………………………………………………………… 103
第21 章 培训规划 ……………………………………………………………………………… 104
第八部分 安全清单
第22 章 安全清单 ……………………………………………………………………………… 109
实验室建筑 …………………………………………………………………………………… 109
储存设施 ……………………………………………………………………………………… 109
环境卫生和工作人员设施 …………………………………………………………………… 109
暖气和通风 …………………………………………………………………………………… 110
照明 …………………………………………………………………………………………… 110
保养 …………………………………………………………………………………………… 110
实验室生物安全保障………………………………………………………………………… 110
防火与消防 …………………………………………………………………………………… 111
易燃液体的储存 ……………………………………………………………………………… 111
压缩气体和液化气 …………………………………………………………………………… 111
电的危害 ……………………………………………………………………………………… 112
个体防护 ……………………………………………………………………………………… 112
工作人员的健康与安全 ……………………………………………………………………… 112
实验室仪器设备 ……………………………………………………………………………… 113
感染性物质 …………………………………………………………………………………… 113
化学品和放射性物质 ………………………………………………………………………… 114
第九部分 参考文献、附录和索引
参考文献 …………………………………………………………………………………………… 117
目录
vii
附录1 急救 ……………………………………………………………………………………… 121
附录2 工作人员的免疫接种…………………………………………………………………… 122
附录3 WHO 生物安全合作中心 ……………………………………………………………… 123
附录4 设备的安全性 …………………………………………………………………………… 124
可能产生危害的仪器设备 …………………………………………………………………… 124
附录5 化学品：危害与预防 ……………………………………………………………………… 127
索引 ………………………………………………………………………………………………… 150