4.3 其他方法
离子束介导法,利用离子束对细胞壁的溅射和刻蚀作用,在细胞表面形成许多微孔道,为外源基因进入细胞提供了路径。倪大虎 等用该法将将抗菌肤 shiva 基因导入到水稻恢复系的成熟胚中,经愈伤诱导和绿苗再生,PCR 检测分析证明外源基因已整合到再生植株的基因组中。吴丽芳 等将水稻几丁质酶基因 RcHS 用离子束介导法转入三个小麦品种中,分别得到了转基因植株,经分子检测证实了 RcH8 基因的整合,再生植株的叶片提取物表现出对小麦赤霉病的抑制作用。脂质体法,用人工合成的、类似生物膜结构功能特性的脂类化学物质(脂质体),将 DNA 包裹成球体,通过植物原生质体的吞噬或融合作用把 DNA 转入受体细胞。激光微束法,利用激光微束精确的定向性和损伤小的特点,将激光聚焦成微米级的微束去照射细胞,在细胞膜上可形成能自我愈合的微孔,使外源 DNA 易进入细胞实现基因的转移。超声波法,利用低声强脉冲超声波的物理作用,击穿细胞膜造成通道,使外源 DNA 进入细胞。
5 植物抗病基因工程的前景展望
植物基因工程是细胞水平和分子水平上的遗传操作,其最大优点是能最大限度地利用人们所感兴趣地外源基因以及使工作更具目的性,给植物抗病育种提供了一条十分有效和有用的途径。在抗病育种方面,科学家可以通过基因工程技术将抗病毒、抗细菌和抗真菌的基因引入植物中,从而提高植物的抗病性。而且,用转基因的方法比常规的杂交育种方法,在育种周期上要缩短3~4年,展示了植物抗病基因工程在育种上的应用前景。
然而植物基因工程本身存在很多问题:外源基因能否稳定高效地表达转基因植物本身的优良性状是否受到影响而且目前可用于转化的抗性基因太少,转移的基因存在基因沉默的现象,都限制了植物抗病基因工程的发展。
因此植物抗病基因工程要获得深入发展,加强相应的基础研究是十分重要的。比如对植物个体遗传发育规律的研究;对植物体内基因表达调控的研究;对植物与病原物之间的特异性作用及其机理研究;对抗性基因的筛选、克隆研究等等。在上述研究的基础上,将合适的抗性基因进行巧妙的加工,通过合适的转化方法,按预定位置插入植物基因组中,并使之在一定的时间和器官中稳定表达,就可以获得大量的抗病转基因植物品种。可以预见,用转基因方法选育抗病植物品种将成为农作物抗病育种中最有效、最常用的手段。
注:
(1)参考文献:略;需者可与本站Email联系,或到中国水稻研究所图书馆查阅;
(2)文章来源:生物技术通报,2005年 第5期;
(3)作者单位:北京林业大学生物科学与技术学院。


