生物秀首页 新闻前沿 产业资讯 实验技术 仪器教程 生物考研 资源下载 生物人 物秀商城 生物论坛 图片 专业 博客 易生物 视频动画
触摸生命科学研究前沿
导航: 生物秀 > 新闻 > 前沿专题 > 转基因技术 > 正文
  • 倾力提供最优!
  • 生物秀实验频道
转基因家禽生产概况
作者:未知 来源:本站原创 时间:2005-10-18

      2.3鸡作为生物反应器的优势 鸡作为生物反应器具有其它哺乳动物所具有的的优点:第一,对鸡自身具有安全性。鸡的输卵管是一个自我封闭的系统,肝脏合成蛋黄中的蛋白质和脂肪,并由血液直接输入输卵管。输卵管的漏斗部、膨大部分泌蛋白,特别是膨大部具有丰富的腺体组织。分泌大量蛋白。输卵管中的蛋白蛋黄不会再回到血液中去,这样可避免大量表达的外源性蛋白对鸡健康造成的危害;第二,鸡的输卵管是有效的蛋白合成器;第三,卵清蛋白启动子可诱导人类珍稀蛋白的表达并对其进行正确的修饰和加工。产物的生物活性接近天然产品;第四,鸡输卵管表达外源蛋白可稳定遗传,一旦获得可生产有价值蛋白的动物个体。可用常规畜牧技术建立转基因鸡的家系,且建群也相对容易些。鸡作为生物反应器还具有哺乳动物所不具有的优点:第一,产物易收集,且产物的取得不影响鸡本身的健康,产物也不易污染。第二,鸡蛋中成分简单,产物易分离。第三,鸡饲养成本低,费用消费低。第四,时代间隔短,实验时间短。
      2.4 鸡作为生物反应器目前所不能克服的缺点禽类的胚胎发育与哺乳类相比较有很多不同点,对它的研究暂时落后于其它动物,使得转基因鸡的应用仍存在较多困难:第一,不易获得大量的受精卵;第二,受精时多精入卵的干扰,使雄性原核不易识别;第三,卵子重新移入母体输卵管内的技术或受精卵体外孵化技术难度大,致使在哺乳动物中已经广泛应用的转基因技术,不适合在禽类中应用。
      3 转基因禽类的制作方法
      3.1 通过显微注射生产转基因
      3.1.1 单细胞受精卵显微注射法 人们发现,当外源DNA注射到海胆、斑马鱼和爪蟾等脊椎动物受精卵细胞质中,当卵快速分裂时,外源DNA能暂时停留染色体外复制,并可低频率地结合到染色体基因组中。得益于上述研究的启示,在体外将外源基因注射到单细胞受精卵细胞质中,经过体外培养后,成功地产生了转基因鸡。但是,此种方法取到一个受精卵需要一只母鸡,若操作失败,一个细胞的损失就相当于一只母鸡的损失,成本较高,并且受精卵体外孵化条件也很复杂,操作难度较大。
      3.1.2 受精卵原核注射法 在国内,李赞东等将脂质体包装后的质粒pMiwz(含有报告基因LacZ)注入囊胚期胚盘中,转基因获得成功,并证明囊胚期注射外源基因可以获得转染的原生殖细胞(PGCs),并能够传给下一代。在国外,Jamie Love等将带有目的基因质粒DNA注射入鸡受精卵的胚胎中,体外培养12 h后发现近一半存活,40%胚胎中含有质粒DNA,有6%相当于每一个细胞含有1个拷贝的外源基因,7只存活至性成熟雏鸡中的一只将3.4%外源基因传递给其后代。此种方法可以得到转基因嵌合体鸡,但转基因细胞的嵌合部位和嵌合程度不容易确定。
      3.2 鸡卵原始胚细胞的弹道转染 该技术最初应用于植物细胞的转基因操作,其中包括两大组成部分:离子加速系统和离子包装系统。白占涛、王跃嗣等曾成功的用牙科无针头注射器将质粒DNA送入鸡胚。其过程如下:使用平均直径在1.5微米的钨离子,待孵化两天后,揭掉0.5cm2外壳,然后将外包DNA的微粒射入暴露出的胚性新月,将洞口封好,把卵送回孵化器。此种方法效率较高,并且由于用的是不同大小的钨离子,而且胚胎新月区下主要是卵黄蛋白,所以不必考虑投射弹的速度和穿入的深度(白占涛等,2000)。鸡胚胎所具有的一系列特点使它更适合于弹道转染:第一,鸡胚材料易得;第二,鸡胚恰好位于外壳下,蛋黄表面;第三,位于胚性新月区的原始胚细胞在发育到12胚龄时易于鉴别;第四,胚性新月是外胚性的;第五,由于胚性新月区下仅有少量细胞,所以在弹道转染时对胚胎组织的伤害很小。但是,由于此方法导入的DNA很难整合到鸡的基因组中,故遗传稳定性和传代性不强。 
      3.3 逆转录病毒载体法 此法是利用病毒正常生命周期特征来感染家禽,从而导入外源并达到整合的目的。现在使用的病毒载体有两类:复制完全型和复制缺陷型(高波,2000)。复制完全型逆转录病毒包含全部结构基因能自我复制,并能重复感染细胞。而复制缺陷型逆转录病毒缺乏部分或全部结构基因,不能自我复制,需在辅助细胞中繁殖,其原理是:将缺失包装信号的辅助病毒核苷酸序列转染进细胞核,这样就产生了辅助细胞,这种细胞可产生所有的病毒成分,但由于缺少包装信号,故不能形成病毒颗粒,但其含有的完整的病毒成分是合成感染性颗粒外壳所必需的;载体是通过保留包装信号而缺失大段病毒基因组产生的;外源基因就是插入到有缺失的逆转录病毒基因组中,并一起转染进辅助细胞;这样,载体中的包装信号利用辅助细胞中的辅助病毒基因序列共同合成了辅助病毒外壳,即感染性颗粒的外壳;因为它含有包装信号,所以能侵染新细胞,又因为它缺失了产生新的病毒颗粒所需要的部分遗传信息,所以不能进一步复制成病毒颗粒。反转录载体法的整合效率比电穿孔和脂质体转染法要高,但是由于基因片段大小的限制和获得高滴度病毒有困难,所以目前主要停留在实验室阶段,还未广泛应用于商业生产(刘向萍,2003)。

    上一页  [1] [2] [3] 下一页

关于〖转基因家禽生产概况〗的最新评论
昵称:      评分: 1分 2分 3分 4分 5分
内容:
生物秀实验频道
Copyright © 2003-2008 生物秀 (中国·生物秀科技) 版权所有 信产部备案:鲁ICP备05001831号
客服信箱:info@bbioo.com  客服电话:15800302289  客服QQ:254857951
www.bbioo.com All Rights Reserved.